А.И. Полинова, Д.Р. Загирова, Л.Ю. Кокаева, И.И. Буско, I. В. Леванцевич, С.Н. Эланский
Соңғы жылдары Беларуссияда картоп пен тұқым қорының фитосанитарлық жағдайы айтарлықтай нашарлады. Агрофитоценоздардағы зиянды организмдердің кейбір түрлерінің рөлі және олардың арақатынасы өзгерді. Көптеген жайылған аурулардың зияндылығы (фитофтороз, альтернариоз, қотырдың барлық түрлері, бактериоз, құрғақ фузариоз шірігі), сонымен қатар жаңа, жеткіліксіз зерттелген, мысалы, жаралы сулы шірік (сурет 1). Үндістанда, Орталық Азияда және басқа оңтүстік елдерде кездесетін бұл ауру Беларуссияның Гомель, Брест, Гродно және Минск облыстарында байқалды. Топырақта тіршілік ететін басқа оомицеттер сияқты, P. шамадан тыс ылғалдылық жағдайында - нашар дренажды жерлерде, ұзақ жауған жаңбыр кезінде үлкен зиян келтіреді (Тейлор және басқалар, 2008).
Беларуссияда аурудың таралуы вегетациялық кезеңнің температурасы жоғарылаған жылдары байқалды: картоптың кейбір партияларында түйнектердің 8-10% -ы зардап шекті. Түйнектердің жаралы сулы шірігі айтарлықтай зиян келтіруі мүмкін, бұл төзімді сорттардың жетіспеушілігінен, дамыған қорғаныс шараларынан және түйнектерге әсер еткенде аурудың тез дамуынан (Журомская, 2003; Иванюк және басқалар, 2005). Ауру тек түйнектерге әсер етеді. Ресейде жараланған сулы шірік әлі маңызды емес.
Бұл жұмыста біз Беларуссияның Ұлттық ғылым академиясының Картоп пен бау-бақша өсіру ғылыми-практикалық орталығының (Минск облысы) қоймаларындағы Вектар Белоруссия, Скарб сорттарының картоп түйнектерінен және асыл тұқымды будандардан бөлінген жаралы сулы шірік қоздырғыштарының 4 штамын зерттедік. Зерттеудің мақсаттары оқшауланған изоляттардың түрлерін, олардың картоп түйнектеріне қатысты вируленттілігін анықтау, қоршаған ортаның әр түрлі температурасында өсуін және металлаксилге төзімділігін анықтау болды.
Изоляттардың мицелийі сұйық бұршақ ортасына өсірілді (180 г мұздатылған жасыл бұршақ 10 литр дистилденген суда 1 минут қайнатылды, содан кейін оларды 30 атмда 1 минут автоклавта ұстады); Әрбір штамнан ДНҚ бөлініп алынды. ДНҚ-ны бөліп алу үшін мұздатылған мицелий сұйық азотта тритурацияланды, CTAB буферінде лизиске айналды, содан кейін хлороформмен депротеинделді. ДНҚ -20 ° С температурада ионсыздандырылған суда сақталды. ITS18 және ITS5,8 (Ақ, 1) праймерлерін қолданып күшейтілген түрге тән геном аймақтарының (1S және 2S ядролық рибосомалық гендерінің аймақтары, сондай-ақ ішкі транскрипцияланған интергендік спейсер ITS1990) нуклеотидтік тізбектерін талдау зерттелген штамдар Pythium ultimum Trow түрлеріне жатады. (Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo & Kakish синонимі).
Барлық зерттелген штамдар ылғалды камераларға орналастырылған картоп түйнектерінің гала кесектеріне әсер етті. Оларда қара дақтар пайда болды, кейінірек дымқыл, терең енетін жараларға айналды (Cурет 2). Инфекция P. ultimate mycelium-ді түйнек тілімінің ортасына орналастыру арқылы жүзеге асырылды.
Егілген түйнек дискілері + 22 ° C температурасында инкубацияланды. Зақымдалған аймақтың максималды өсу қарқыны алғашқы 2 күнде байқалды, содан кейін жара аймағы іс жүзінде өзгерген жоқ.
Бұл үлгі барлық зерттелген штамдар үшін жарамды болды.
Штамдардың өсу қарқыны сұлы агарының ортасында 5, 15, 24 және 34 ° C температурада бағаланды (3-сурет). Өсу барлық температурада байқалды; өсудің максималды жылдамдығы 24 ° C-та байқалды (86 мм кесе 2 күнде толығымен өсіп кетті). 15 және 34 ° C температурада өсу қарқыны едәуір төмен болды (кесе сәйкесінше 4 және 3 күнде өсіп кетті).
15, 24 және 34 ° C температурада барлық зерттелген штамдардың өсу қарқыны әр түрлі болған жоқ. 5 ° C температурада P1 штаммы басқаларға қарағанда едәуір тез өсті (20-ші күні 4 мм), P4 - біршама баяу (10-ші күні 4 мм), P2 және P3 іс жүзінде өскен жоқ.
Сондай-ақ, 24 ° C температурада өсу ыдысқа отырғызылғаннан кейін бірден басталғанын, 15 және 34 ° C температурада белсенді өсудің басталуы 1 тәулікке, ал 5 ° C температурада - 2 күнге кешіктірілгенін атап өткен жөн.
Металаксил (және оның изофері мефеноксам) топырақтың оомицеттерін бақылауға арналған ең тиімді дәрілер ретінде танылады. Металлаксил түйнектерге еніп, оларды (тіпті өте төмен концентрацияда) ұзақ мерзімді қорғауды қамтамасыз ете алады (Тейлор және басқалар, 2008, Брюин және басқалар, 1982). Алайда метаксилдің тиімділігі популяцияларда төзімді штамдар пайда болғаннан кейін күрт төмендейді. Құрама Штаттардың бірнеше аймақтарында жоғары төзімді штамдар табылды (Тейлор және басқалар, 2002). Беларуссиялық P. штамдарының металлаксилге төзімділігі туралы мәліметтер жоқ, сондықтан олардың препаратқа төзімділігін осы жұмыста тексеру туралы шешім қабылданды.
Фунгицидтің металлаксиліне сезімталдығын зерттеу сұлы агарының ортасында әртүрлі концентрациядағы фунгицидті қосумен жүргізілді (Побединская және Эланский, 2014).
Зерттелген штамдардың металлаксилге төзімділігі бойынша кейбір айырмашылықтар болды (кесте 1). Осылайша, фунгицидтің концентрациясы 1 мг / л болған кезде P4 штаммының өсуі толығымен тоқтап, қалған штамдар айтарлықтай баяулады. Р1 және Р2 штамдары метаксил концентрациясы 10 мг / л ортада өте баяу өсті. EC50 есептелген тиімді концентрациясы (фунгицидтің концентрациясы штаммның өсу жылдамдығын бақылауға қарағанда 2 есе төмендетеді) барлық штамдар үшін 1 мг / л-ден аз болды. Осылайша, зерттелген барлық штамдар металлаксилге сезімтал болды; ол P. ultimum өсуін тежейтін жоғары тиімді екендігі көрсетілген.
Бруин және т.б. (1982) өсімдіктер вегетациясы кезінде 0,5 кг / га дозада металлаксилмен өңделгеннен кейін түйнектерде фунгицидтің жиналуы перидермада 0,055 мкг / г, кортикальды қабатта 0,022 мкг / г, ал түйнектің орталық бөлігінде 0,034 мкг / г болды. Біздің мәліметтеріміз бойынша, металлаксилдің бұл концентрациясы ауруға қарсы тұру үшін жеткіліксіз, бірақ оның дамуын бәсеңдетуі мүмкін.
Сұлы ортада өскенде барлық штамдар монокультурада ооспоралар түзді (4-сурет), бұл P. ultimum-ге тән. Штамдарды екіге бөлу вегетативті сәйкессіздік белгілері байқалмады - кеселер мицелиймен біркелкі жабылған.
Алынған мәліметтер P. ultimum - кең температура диапазонында, оның ішінде 5 ° C сақтау температурасында тез өсуге қабілетті фитопатоген. Ол картоп түйнектерінің тіндеріне зиянды әсер етеді және ұзақ өмір сүруге қабілетті ооспоралар түзеді. Сонымен, бұл түр ауыл шаруашылығына қауіп төндіруі мүмкін және қосымша зерттеуді қажет ететін қауіпті фитопатоген болып табылады.
Зерттеулер Ресей ғылым қорының қолдауымен жүргізілді (жоба N 14-50-00029).
Кесте 1. P. шекті штамдарының металлаксилге сезімталдығы
Штамм | Метаксил концентрациясы, мг / л | ||
0 (басқару) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
Шамамен. 3 өлшеу үшін орташа деректер келтірілген.
Мақала «Картопты қорғау» журналында жарияланған (No1, 2017 ж.)